流式细胞技术

• 流式细胞术(Flow Cytometry)是一种对悬浮于流体中的单个细胞或微粒进行高速、多参数的细胞定量分析和分选的生物学技术。它能在细胞流经检测设备时，同步分析其物理特性（如大小、颗粒度）和化学特性（如表面及胞内蛋白表达），从而实现对复杂细胞群体的精准解析。
• 截至目前，yl23455永利集团承接的流式检测项目已经数千项，包括:
  细胞表面抗原表达的流式检测；细胞增殖、细胞分化、细胞凋亡等的流式分析；动物外周血及各免疫器官检测；移植瘤模型流式检测等。
  yl23455永利集团流式检测团队将每一个案例的特点与多年实战经验和技术积累相结合，谨慎地将优质实验结果提交到客户手上，持续助力客户的研发项目获批。

  

yl23455永利集团流式分析平台

• yl23455永利集团流式分析平台致力于探索和洞见肿瘤免疫靶向治疗药物的进展，于早期研发阶段提供准确的可依靠的试验预测数据。我们的团队具有丰富的实验操作、流式方法开发和数据分析经验，人均可独立负责项目。平台配备有多台BD品牌的强大流式细胞检测仪，最新引进的高参数的BD FACSymphony A5流式细胞分析仪，配置五激光31参数，可同时启用多达29种颜色，能够满足客户科研和分析需要。
  平台建立至今已积累了众多国内外知名医药企业及科研机构客户，包括日本武田制药、上海恒瑞医药、广州百奥泰以及三生国建等，并达成多年的持续合作，获得客户持续的信任和好评。
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  流式细胞分析和流式细胞分选技术的区别

• 流式分析服务内容：

  方法开发和样品检测
  yl23455永利集团流式平台有小鼠、大鼠、犬、猴等种属以及免疫缺陷、转基因、人源化等动物模型的流式检测方法开发和样本检测经验，拥有外周血、脾脏、淋巴节、骨髓、肿瘤、肝脏、肺脏、腹水、胸腺等多种样本处理经验。
  

  细胞免疫表型分析
  建立了从基础分析方案(T、B、NK细胞)到复杂的检测分析方案(调节性T细胞、髓系细胞、树突状细胞分析、干细胞分化等)，涉及细胞表面蛋白、胞内/核内蛋白(转录因子/趋化因子/细胞因子/磷酸化等)检测，可以满足客户检测分析需求。

  多细胞因子检测
  yl23455永利集团流式平台提供采用ELISA、Luminex、MSD、EliSpot、FluoroSpot、流式CBA悬浮芯片技术等进行高参数的细胞因子检测服务，每次检测仅需微量样本，检测特异性强，稳定性好，可重复性高。

  抗体药物受体占有率（RO）项目
  2017年至今，使用FACS技术已完成临床/临床前RO检测多项，涉及PD-1，CD20，CD47和TIGIT等多种不同靶蛋白的检测。

  新型免疫细胞制品药物的生物分析
  包括干细胞、CAR-T细胞和CAR-NK细胞等细胞治疗产品及基因疗法药物的生物分析。

  Assay	Cell	Medicilon capability (Human/Mouse/Rat/Monkey/Dog)
  FACS	T cell /Treg	Yes (Human,Mouse,Rat,Monkey,Dog)
  	B cell	Yes (Human,Mouse,Rat,Monkey,Dog)
  	NK cell	Yes (Human,Mouse,Rat,Monkey)
  	Macrophage,Monocyte,Neutrophil	Yes (Human,Mouse,Monkey)
  	DC cell	Yes (Human,Mouse,Monkey)
  	MDSC	Yes (Human,Mouse,Monkey)
  	Checkpoint	Yes (Human,Mouse)
  	Receptor Occupancy	Yes (Human,Mouse,Monkey)
  Cytokine	Phosphorylation	Yes (Human,Mouse)
  	Elisa	Yes (Human,Mouse,Rat,Monkey)
  	CBA	Yes (Human,Mouse,Rat,Monkey)
  	Luminex	Yes (Human,Mouse,Rat,Monkey)
  	MSD	Yes (Human,Mouse,Rat,Monkey)
  	ELISpot , FluoroSpot	Yes (Human,Mouse,Monkey)
  Cell differentiation polarization	T/M1/M2 macrophage	Yes (Human)
  Cell cytotoxicity	ADCC, ADCP	Yes (Human)

  持续更新中

  

  食蟹猴细胞亚群流式检测实例

  

  小鼠NK、T细胞亚群流式检测实例

• yl23455永利集团FACS检测仪器设备

  BD Symphony A3/Fortessa/Celesta 可以检测不同的血液和组织样本
  

  拥有5激光，29通道配置，50+ Panels得到验证；
  利用全反射的光路结构设计，避免透射过程对光信号的损耗，提高分析的灵敏度，能够识别和分析罕见的细胞类型和情况；
  先进的流式产品，可实现对免疫系统大数据的获取和分析，为探索未知的免疫组学提供了广阔平台。

             

• yl23455永利集团案例: FACS 检测

  在FCM处理和检测后，可以使用FLOWJO对血液/淋巴结/脾脏/骨髓/肿瘤等样本进行分析。目前已有50多个经过验证的Panels。

  

  Data shown was Mouse Treg&Teff Panel_mouse_Tumor
  在 FCM 处理和检测后，可以使用 FLOWJO 对血液/淋巴结/脾脏/骨髓/肿瘤等样本进行分析。目前已有 50 多个经过验证的 Panels
  
  
  Data shown was Cyno T/B/NK Panel_monkey_Blood
  血样经过 FCM 处理和检测后，可以使用 Flowjo 进行受体占位分析。

  

  Data shown was Receptor Occupancy_Cynomolgus monkey_Blood

多细胞因子检测

• yl23455永利集团多因子检测服务仪器设备

  通过Covaris E220R/BIO-RAD Bio-Plex 200/MD SPECTRAMAX M2/MSD处理细胞因子后，可以分析不同的血清/血浆和组织样本，可检测多达40多个因子。

  

  Covaris E220系列超声破碎仪可以非常快速和完全地进行均质化、样品分散和样品抽提。样本回收效率高，重复性好，整个处理过程恒温，非接触。Bio-Plex 200系统采用流式细胞技术对染色的微球在液流路中逐个循序通过。相较于传统的ELISA检测方案，在样本使用量和检测通量方面优势明显，大大节省了人力和物力成本。

• yl23455永利集团案例: Cytokine 检测

  细胞上清/血清/血浆/肝脏/肺脏/肿瘤等样本经过体内或体外给药刺激后可进行检测分析。

  

  Data shown was CBA_Cynomolgus monkey_Plamsa
  PBMC/MNC/脾脏等样本经体内或体外给药刺激后，可通过CTL荧光酶联免疫斑点分析仪(CTL-ImmunoSpot S6)检测分析。

  

  Data shown was EliSpot/FluoroSpot_PBMC

细胞功能检测

• 与流式细胞仪，酶标仪或荧光显微镜配合使用检测细胞分化/溶解/吞噬/杀伤活性，适用于多种哺乳动物细胞系。

  

• yl23455永利集团案例: 细胞功能检测

  肿瘤细胞经 Daratumumab 或 Rituximab 体外孵育后，更容易被巨噬细胞吞噬。样本经由 FCM 处理和检测后，可用 Flowjo 对细胞系/血液/组织样本分析。

  

  Data shown was ADCP_PBMC

总结与展望

• 自肿瘤、自身免疫病及呼吸道疾病等发展日益复杂以来，流式细胞术已成为功能和安全性评价中重要的分析手段。借助新一代的高速单光子传感器，流式细胞术将可能发展成为较灵敏的荧光检测系统，从而带来新的可能性，例如进行lifetime fluorescence analysis，可以观察到蛋白构象变化。
  随着高度冷却、低噪声的单光子传感器技术完全数字化，将使绝对定量成为可能，将测量实际光子数，而不是现在流式中常用的arbitrary units，使得世界各地的仪器之间绝对定量结果可以进行直接比较，将对临床流式和药理学产生巨大影响。流式细胞术应用的最终目标是在单细胞水平上发现细胞受体和功能之间直接和决定性关系。今天的大多数流式细胞仪都集中在免疫表型上，但免疫分型绝不是流式细胞术的唯一机会，如果将流式细胞术中无法常规检测的指标与细胞周期、代谢和结构组分等相结合起来，未来的应用场景几乎是无限的。

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FAQs

• 什么是流式细胞术

  流式细胞术（Flow Cytometry，简称FCM）是一种高效、精准且客观的分析技术，能够同时检测单个细胞在快速直线流动状态下的多项物理和生物学特征，并进行定量分析与分选。

  流式细胞仪（Flow Cytometer）则是一种集激光技术、电子物理技术、光电测量技术、计算机技术、细胞荧光化学技术以及单克隆抗体技术于一体的高科技仪器，广泛应用于细胞分析和分选研究等领域。

• 流式细胞仪的优势有哪些？

  1. 检测速度快，分析样本量大

  流式细胞仪能够在极短时间内分析大量细胞，这是其区别于其他细胞分析仪器的主要特点，测量速率可高达每秒上万个细胞。

  2. 可同时分析单个细胞的多种特征

  通过使用不同荧光素标记的单克隆抗体或者荧光染料对细胞进行荧光染色，流式细胞仪可以获取单细胞的多种信息。

  3. 检测样本种类多样

  流式细胞仪能够检测多种样本，包括外周血、骨髓、细针穿刺样本、灌洗液、实体组织，以及悬浮或贴壁培养的细胞。此外，还可用于分析微生物及人工合成微球等样本。

  
  

• 流式细胞术在药物发现中的应用

  在治疗靶点筛选和联合用药的创新研究中，流式细胞术有助于研究者在药物开发早期评估不同个体间的生物学差异，从而进一步阐明药物有效性的作用机制。此外，该技术能够对肿瘤微环境、外周血及其他宿主组织中的免疫系统进行高通量、定量化分析，有助于更准确地预测免疫治疗疗效，并推动免疫治疗策略的持续优化与规模化发展。

  流式细胞术几乎可应用于药物发现的各个阶段——从靶点鉴定、先导化合物筛选到大分子药物、ADC 和疫苗开发。药物靶标涵盖了细胞内外多种生物分子结构，包括细胞膜蛋白、信号传导蛋白、结构蛋白，以及基因水平的 DNA 和 RNA 等。

  在早期研究中，通过高通量方式表征大型且多样化的细胞群体，有助于靶点筛选。利用荧光探针标记与疾病相关的细胞分子特征，可以快速评估细胞的结构和功能状态，如蛋白表达丰度或膜完整性。完成靶蛋白鉴定和先导化合物筛选后，研究人员还可利用流式细胞术评估候选药物的功效与毒性。

• 流式细胞术在免疫学检测中的应用

  流式细胞术常结合单克隆抗体，用于识别免疫活性细胞、量化表面标志物的表达变化，并在功能检测前分离特定细胞亚群。

  随着多激光、多色荧光技术及多参数分析计算系统的发展，该技术显著提升了免疫学研究、疾病诊断、疗效预测和治疗监测的准确性。当前的高通量流式系统已能在一天内对数百个样本进行自动化多参数分析，为免疫学研究提供了强大支持。

• 所有研究均在同一园区内实验室有序完成，切实保证实验进度和项目沟通的高效性，占据数据获取和评估的行业优越性。